Руководство методы исследований дезинфекционных средств

Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности

Обозначение:	Р 4.2.2643-10
Обозначение англ:	R 4.2.2643-10
Статус:	действует
Название рус.:	Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности
Дата добавления в базу:	01.09.2013
Дата актуализации:	01.01.2021
Дата введения:	02.06.2010
Область применения:	Руководство устанавливает единые методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их антимикробной, инсектицидной, акарицидной, репеллентной и родентицидной активности, эффективности и безопасности при применении в быту, в лечебно-профилактических организациях и на других объектах для обеспечения безопасности жизни и здоровья людей, животных и неповреждения объектов внешней среды. Руководство предназначено для организаций, учреждений, предприятий, аккредитованных испытательных центров лабораторий, органов по сертификации дезинфекционных средств, аккредитованных в системе аккредитации ГОСТ Р, специалистов, осуществляющих исследования дезинфицирующих, стерилизующих, дезинсекционных, дератизационных средств, а также их субстанций (действующих веществ) в процессе их разработки, производства, применения, регистрационных и сертификационных испытаний, производственного контроля и надзора.
Оглавление:	1. Область применения 2. Нормативные ссылки 3. Общие положения 4. Химико-аналитические методы исследований дезинфекционных средств    4.1. Общие положения    4.2. Методы количественного определения действующих веществ в дезинфицирующих, стерилизующих средствах и средствах для предстерилизационной очистки    4.3. Методы исследования дезинсекционных средств    4.4. Методы исследований дератизационных средств    4.5. Библиографические данные 5. Микробиологические методы исследований и критерии оценки эффективности дезинфицирующих и стерилизующих средств    5.1. Методы изучения и оценки бактерицидной активности дезинфицирующих средств и их субстанций    5.2. Методы изучения и оценки туберкулоцидной активности дезинфицирующих средств    5.3. Методы изучения и оценки фунгицидной активности дезинфицирующих средств    5.4. Методы определения активности антимикробных материалов тканей, лакокрасочных покрытий    5.5. Методы определения эффективности кожных антисептиков    5.6. Методы определения эффективности ДС и кожных антисептиков в практических условиях    5.7. Методы изучения и оценки вирулицидной активности дезинфицирующих средств    5.8. Методы изучения и оценки спороцидной активности дезинфицирующих и стерилизующих средств    5.9. Методы исследований и критерии оценки эффективности средств для предстерилизационной очистки ИМН 6. Энтомологические методы исследований и критерии оценки эффективности дезинсекционных средств    6.1. Общие положения. Организация экспериментов    6.2. Методы определения активности действующих веществ субстанций дезинсекционных средств    6.3. Методы определения активности инсектицидных средств    6.4. Методы изучения активности акарицидных и инсекто-акарицидных средств    6.5. Методы определения активности инсекто- и акарорепеллентных средств    6.6. Методы определения активности средств на основе регуляторов развития насекомых и аттрактантов феромонов    6.7. Методы определения эффективности инсектицидных, акарицидных и репеллентных средств в натурных условиях 7. Родентологические методы исследований и критерии оценки эффективности дератизационных средств    7.1. Общие положения. Требования к экспериментальным животным и условиям их содержания    7.2. Методы исследований эффективности химических родентицидных средств    7.3. Методы исследования эффективности репеллентов    7.4. Методы исследований эффективности механических дератизационных средств    7.5. Методы исследований эффективности химических родентицидных средств в условиях группового содержания грызунов    7.6. Методы оценки эффективности дератизационных средств в естественных местообитаниях грызунов в натурных условиях    7.7. Библиографические данные 8. Методы исследования и критерии оценки токсичности и опасности дезинфекционных средств    8.1. Общие требования к организации и проведению токсикологических исследований дезинфекционных средств    8.2. Методы изучения токсичности и опасности микробоцидных дезинфицирующих средств    8.3. Методы изучения токсичности и опасности средств для стерилизации и предстерилизационной очистки изделий медицинского назначения ИМН    8.4. Методы изучения токсичности и опасности кожных антисептиков    8.5. Методы изучения токсичности и опасности средств для обеззараживания питьевой воды при нецентрализованном водоснабжении    8.6. Методы изучения токсичности и опасности средств для обеззараживания воды плавательных бассейнов    8.7. Методы изучения токсичности и опасности дезинсекционных средств    8.8. Методы изучения токсичности и опасности репеллентных средств    8.9. Методы изучения токсичности и опасности педикулицидных средств    8.10. Методы изучения токсичности и опасности дератизационных средств    8.11. Библиографические данные
Разработан:	НИИ дезинфектологии Институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марциновского МЗ РФ ГУ Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова ФГУН 48 НИИМ МО РФ
Утверждён:	01.06.2010 Главный государственный санитарный врач Российской Федерации
Издан:	Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора (2011 г. )
Расположен в:	Техническая документация Экология ЗДРАВООХРАНЕНИЕ Стерилизация и дезинфекция Стерилизация и дезинфекция, прочие аспекты
Заменяет собой:	МР 1119-73 «Методические рекомендации по определению вирулицидной активности препаратов» Методические указания «Методы испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности» 739-68 «Инструкция по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих средств»
Нормативные ссылки:	Федеральный закон 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» МР 1119-73 «Методические рекомендации по определению вирулицидной активности препаратов»

Р 4.2.2643-10

Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности

Обозначение:	Р 4.2.2643-10
Обозначение англ:	R 4.2.2643-10
Текущий статус документа:	действует
Название документа рус.:	Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности
Дата актуализации текста:	01.12.2013
Дата введения:	02.06.2010
Область применения:	Руководство устанавливает единые методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их антимикробной, инсектицидной, акарицидной, репеллентной и родентицидной активности, эффективности и безопасности при применении в быту, в лечебно-профилактических организациях и на других объектах для обеспечения безопасности жизни и здоровья людей, животных и неповреждения объектов внешней среды. Руководство предназначено для организаций, учреждений, предприятий, аккредитованных испытательных центров лабораторий, органов по сертификации дезинфекционных средств, аккредитованных в системе аккредитации ГОСТ Р, специалистов, осуществляющих исследования дезинфицирующих, стерилизующих, дезинсекционных, дератизационных средств, а также их субстанций (действующих веществ) в процессе их разработки, производства, применения, регистрационных и сертификационных испытаний, производственного контроля и надзора.
Разработан:	НИИ дезинфектологии Институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марциновского МЗ РФ ГУ Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова ФГУН 48 НИИМ МО РФ
Утверждён:	01.06.2010 Главный государственный санитарный врач Российской Федерации
Издан:	Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора (2011 г. )
Заменяет собой:	Методические указания «Методы испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности» 1119-73 «Методические рекомендации по определению вирулицидной активности препаратов» 739-68 «Инструкция по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих средств»
Нормативные ссылки:	Федеральный закон 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения»

3.5. ДЕЗИНФЕКТОЛОГИЯ

МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИСПЫТАНИЙ ДЕЗИНФЕКЦИОННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ОЦЕНКИ ИХ ЭФФЕКТИВНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ

5. ВВЕДЕНЫ ВЗАМЕН «Методических рекомендаций по определению вирулицидной активности препаратов» (от 6.09.1973 N 1119-73), «Инструкции по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих средств» (от 6 мая 1968 г. N 739-68), Методических указаний «Методы испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности», 1998 г.

1. Область применения

1.3. Руководство разработано на основе Федерального закона от 30.03.1999 N 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» [1], Федерального закона от 10.01.2002 N 23001 «Об охране окружающей среды»* [2], Федерального закона «Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан» от 22.06.1993 N 5487-1** [3], Постановления Правительства от 04.04.2001 N 262 «О государственной регистрации отдельных видов продукции, представляющих потенциальную опасность для человека, а также отдельных видов продукции, впервые ввозимых на территорию Российской Федерации» [7], а также «Положения о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании», утвержденного постановлением Правительства Российской Федерации от 24 июля 2000 г. N 554 [6], и других нормативных и методических показателей, приведенных в разделе 2 «Нормативные ссылки».

______________

* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: Федеральный закон от 10.01.2002 N 7-ФЗ «Об охране окружающей среды», здесь и далее по тексту;

2. Федеральный закон от 10.01.2002 N 23001 «Об охране окружающей среды»*.

______________

3. «Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан» от 22 июня 1993 г. N 5487-1* (с изменениями от 2 марта 1998 г., 20 декабря 1999 г., 2 декабря 2000 г., 10 января, 27 февраля, 30 июня 2003 г., 29 июня, 22 августа, 1, 29 декабря 2004 г., 7 марта, 21, 31 декабря 2005 г., 2 февраля 2006 г.).

4. Федеральный закон от 16.09.1998 N 158-ФЗ «О лицензировании отдельных видов деятельности»*.

_________________

5. Федеральный закон от 10.06.1993 N 5151-1 «О сертификации продукции и услуг»*.

_________________

9. Приказ Минздрава России от 20.07.1998 N 217 «О гигиенической оценке производства, поставки и реализации продукции и товаров»*.

_________________

11. Постановление Госстандарта России от 30.07.2002 N 64 «Номенклатура продукции, в отношении которой законодательными актами Российской Федерации предусмотрена обязательная сертификация»*.

_________________

12. СП 3.1/3.2.558-96* «Общие требования по профилактике инфекционных и паразитарных заболеваний».

_________________

19. СанПиН 2.1.7.728-99* «Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактических учреждений».

_________________

26. ГОСТ 8728-77* «Диметилфталат. Технические условия».

_________________

51. Инструкция по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих средств*. Утв. МЗ СССР 06 мая 1968 г., N 739-68.

_________________

Методы определения содержания активно действующего вещества в дезинфицирующих средствах и их растворах

Качество дезинфекции
во многом зависит от правильного выбора
дезинфицирующих средств с учетом
конкретных условий, т.е. с учетом
биологических особенностей возбудителя.

До приготовления
дезинфицирующего раствора необходимо
определить процент действующего вещества
в препарате. Это позволит правильно
рассчитать необходимое количества
препарата для приготовления рабочего
раствора нужной концентрации.

Концентрацию
рабочих растворов дезинфицирующих
средств (табл. 4) определяют, исходя из
цели дезинфекции (профилактическая или
вынужденная) и принадлежности возбудителя
болезни к группе, соответствующей по
устойчивости к действию химических
дезинфицирующих средств.

По устойчивости
к химическим дезинфицирующим средствам
возбудителей основных инфекционных
болезней животных и птицы делят на
четыре группы: малоустойчивые, устойчивые,
высокоустойчивые и особо устойчивые
(табл. 5).

Таблица 4.
Концентрация растворов химических
дезинфицирующих средств для профилактической
и вынужденной дезинфекции, %

Примечание:для профилактической
дезинфекции объектов животноводства
применяют химические дезинфицирующие
средства в концентрации, указанной для
возбудителей первой группы устойчивости.

В хозяйствах
промышленного типа и комплексах
профилактическую дезинфекцию проводят
по регионам, в соответствии с действующими
инструкциями по дезинфекции.

Растворы натра
едкого, кальцинированной соды применяют
горячими (80-90С).
Взвесь свежегашеной извести и
кальцинированную соду используют только
для профилактической и текущей
дезинфекции.

При туберкулезе
и паратуберкулезе натр едкий и формалин
или параформ применяют в виде щелочного
раствора формальдегида, содержащего
3% щелочи и 3% формальдегида, а при микозах
соответственно 1% и 2%.

Таблица 5.
Устойчивость к химическим дезинфицирующим
средствам возбудителей основных
инфекционных болезней

Для профилактической
дезинфекции при инфекциях, возбудители
которых относятся к группе малоустойчивых
(группа 1). Применяют (в пересчете на ДВ)
0,3%-ный раствор глутарового альдегида,
3%-ный раствор формальдегида, 2%-ный
раствор хлорамина или перекиси водорода,
1%-ный раствор (по препарату) йодеза.

Для профилактической,
а также вынужденной (текущей и
заключительной) дезинфекции при
инфекциях, возбудители которых относятся
к группе устойчивых (2 группа), и при
вынужденной дезинфекции относящихся
к группе малоустойчивых (1 группа),
применяют 0,5%-ный раствор глутарового
альдегида, 4%-ный раствор формальдегида,
3%-ный раствор хлорамина Б или перекиси
водорода, 1%-ный раствор (по препарату)
йодеза.

Возбудители,
относящиеся к группе особо устойчивых
(4 группа), контроль качества дезинфекции,
который осуществляют по выделению
Bacillus
cereus,
применяют рабочий раствор, содержащий
2% глутарового альдегида, 4% формальдегида,
5% перекиси водорода, 3% йодеза. Обработку
проводят с интервалом 1,5-2 часа.

Экспозиция
дезинфекции при малоустойчивых и
устойчивых возбудителях инфекционных
болезней составляет 3 часа, при особо
устойчивых – 24 часа. По окончании
экспозиции дезинфекции поилки, кормушки
и оборудование промывают водой от
остатков препарата, а помещения
проветривают и просушивают, после чего
разрешают их использовать по назначению.

Определение
содержания активного хлора в хлорной
извести (в препарате и его растворах)

Аппаратура,
реактивы и растворы.
Весы лабораторные, измерительная колба
или мерный цилиндр на 100, 200, 250, 500 или
1000 см³;
пипетки на 10, 25, 50 или 100 см³;
эрленмейеровская колба на 250-500 см³;
бюретка 50 см³;
2%-ный раствор йодистого калия; соляная
кислота; деци- или сантинормальный
раствор серноватистокислого натрия
(гипосульфата); 1%-ный раствор крахмала
(индикатор).

Ход определения.
Из разных мест берут 1 кг хлорной извести,
тщательно перемешивают и из этой пробы
отвешивают на весах 1 г, после чего ее
быстро растирают в фарфоровой ступке
с небольшим количеством дистиллированной
воды, смывают тщательно водой в
измерительную колбу или мерный цилиндр
емкостью 100, 250, 500 или 1000 см³
и к содержимому колбы добавляют
дистиллированной воды до метки или
полного объема мерного цилиндра,
тщательно перемешивают и, не давая
осадку осесть, отбирают пипеткой 1/10
часть емкости (10, 25, 50 или 100 см³)
и вносят в эрленмейеровскую колбу. Сюда
же приливают 10 см³
2%-ного раствора йодистого калия и 10-15
капель соляной кислоты, перемешивают,
закрывают колбу пробкой и ставят в
темное место на 5 минут.

В этой реакции
выделяющийся из хлорной извести хлор
вытесняет эквивалентное хлору количество
йода из раствора йодистого калия и
занимает его место. От выделения йода
жидкость окрашивается в интенсивно
желтый цвет, ее титруют 0,1н раствором
серноватисто-кислого натрия до
слабо-желтого оттенка. Прибавляют 1 см³
индикатора (1%-ного раствора крахмала)
и окрасившуюся в синий цвет жидкость
продолжают титровать до полного
обесцвечивания. Расход тиосульфата
натрия укажет на эквивалентное количество
связанного йода, а отсюда легко подсчитать
количество хлора во взятой хлорной
извести:

Ca(ClO)₂
+ 2KI + 2HCl = CaCl₂
+ 2KCl + H₂O
+ J₂
+ O;

I₂
+ 2Na₂S₂O₃
= 2NaI
+ Na₂S₄O₆.

Из этих уравнений
видно, что вес одной части хлора равен
весу одной части йода, а вес одной части
йода равен весу одной части Na₂S₂O₃.

Процентное
содержание активного хлора вычисляют
по формуле:

;

Где Х – содержание
активного хлора, %; V
– объем 0,1н раствора сернисто-кислого
натрия, израсходованного на титрование
анализируемой пробы, см³;
К – коэффициент поправки 1,1 тиосульфита
натрия; 0,00355 – масса активного хлора,
соответствующая 1 см³
0,1н раствора серноватисто-кислого
натрия, г; 100 – коэффициент для перевода
в проценты; 1/10 – часть навески.

Пример. Навеска
хлорной извести 1 г разбавлена 100 см³
воды. Взято для титрования 10 мл взвеси
(0,1 навески хлорной извести). На титрование
этой взвеси пошло 6,6 см³
0,1н раствора тиосульфата натрия с
поправочным коэффициентом 1,1. Навеска
равна 1г, а 1/10 часть ее , взятая для
титрования, — 0,1г.

Массовую долю
активного хлора определяют по формуле:

,
следовательно, в испытуемой извести
содержится 25,8% активного хлора.

Определение
процентного содержания активного хлора
в растворах хлорной извести

Если раствор
хлорной извести приготовлен за несколько
дней до его применения, то перед
применением в нем определяют процентное
содержание активного хлора.

К 50 см³
2%-ного раствора йодистого калия приливают
50 см³
дистиллированной воды и для подкисления
5 см³
раствора соляной кислоты. После
взбалтывания добавляют 1 см³
испытуемого раствора хлорной извести
и полученную смесь титруют 0,1н раствором
тиосульфата натрия. В конце титрования
добавляют 1 см³
индикатора (1%-ного раствора крахмала)
и титруют до полного обесцвечивания.
По количеству гипосульфита, израсходованного
на реакцию, определяют содержание
активного хлора в 1 см³
испытуемого раствора хлорной извести,
учитывая, что 1 см³
децинормального раствора гипосульфита
эквивалентен 0,00355 г хлора. Допустим, что
на титрование пошло 15 см³
гипосульфита, тогда:

0,0035515=0,05325
или 0,05325100=5,32%.

Определение
процентного содержание едкого натра в
растворе

Растворы
натрия гидроокиси готовят путем простого
растворения препараты в воде. Процентное
содержание натрия гидроокиси в растворе
определят методом титрации. При
исследовании пользуются следующей
посудой и реактивами.

Посуда:
градуированные пипетки на 10 мл – 2 шт.;
лабораторные стаканчики или мензурки
на 100 мл – 3 шт.; флаконы на 150-200 мл – 2
шт.; флакон на 25-50 мл – 1 шт.; глазная
пипетка – 1 шт.

Реактивы:
0,5н раствор хлористоводородной кислоты;
0,1% раствор метилоранжа (растворяют 0,1
индикатора в 100 мл дистиллированной
воды); испытуемый раствор едкого натра.

Ход
определения.
Градуированной пипеткой набирают 10 мл
раствора едкого натра и вносят в
стаканчик. Глазной пипеткой добавляют
туда 2-3 капли 0,1%-ного водного раствора
метилоранжа. Жидкость в стаканчике
приобретает желтовато-коричневый цвет.
Другой пипеткой набирают 0,5н раствор
хлористоводородной кислоты и титруют,
добавляя струйками, затем по каплям при
постоянном помешивании до появления
розового окрашивания. Удобно проводить
титрование из бюретки со стеклянным
краником.

Замечают,
сколько 0,5н хлористоводородной кислоты
ушло на титрование, и процент едкого
натра в растворе определяют по формуле:

,
где а – количество мл 0,5н раствора
хлористоводородной кислоты; 0,02 – титр
хлористоводородной кислоты; 100 –
множитель для перевода в процент; 10 –
количество мл испытуемого раствора
щелочи.

Определение
концентрации едкого натра в растворе
по удельному весу.

Посуда и приборы:
стеклянный цилиндр на 0,5 или 1 л – 1 шт.;
набор денсиметров (от 1,000 до 1,160 ед.
плотности); раствор едкого натра должен
иметь температуру 18-20С.

Таблица 6. Концентрация
едкого натра в растворе по удельному
весу

Определение
процентного содержания формальдегида
в формалине (метод титрации)

Реактивы
и посуда:
1) нормальный раствор едкого нара; 2)
децинормальный раствор йода; 3)
децинормальный раствор тиосульфата
натрия; 4) хлористоводородная кислота
– нормальный раствор; 5) 1%-ный раствор
крахмала; 6) колба коническая до 500 мл;
7) бюретки.

Титрование
формальдегида основано на том, что при
взаимодействии формальдегида с
сернокислым натрием (сульфитом) происходит
количественное освобождение гидрата
окиси натрия с образованием бисульфитного
соединения формальдегида:

CH₂O
+ Na₂SO₃
+H₂O
= NaOH + CH₂NaSO₃OH.

Ход
определения.
В коническую колбу вливают 30 мл нормального
раствора едкого натра, 50 мл разбавленного
в 20 раз формалина (к 5 мл формалина
добавляют 95 мл воды) и 100 мл децинормального
раствора йода, который приливают из
бюретки медленно небольшими порциями
и осторожными круговыми движениями
колбы смешивают прилитую порцию йода
с имеющейся в колбе жидкостью, затем
колбу закрывают пробкой и ставят в
темное место на 30 мин., после чего
добавляют 40 мл нормального раствора
хлористоводородной кислоты. При этом
почти бесцветная жидкость становится
бурой. Ее титруют децинормальным
раствором тиосульфата. Когда смесь
приобретет слабо-желтую окраску, в колбу
вливают 1 мл раствора крахмала (индикатор).
Окрасившуюся в синий цвет жидкость
продолжают титровать до полного
обесцвечивания. Содержание формальдегида
в процентах вычисляют по формуле:

X
= (100-Y)0,00152020,

Где
Х – процент формальдегида в формалине;
100 – количество раствора йода (мл); Y
– количество тиосульфата (мл), пошедшее
на титрование; 0,0015 — грамм-эквивалент
формальдегида; 20 – разведение
формальдегида; 20 – множитель для
процентного выражения.

Определение
формальдегида в формалине по удельному
весу.

Реактивы
и посуда:
стеклянный цилиндр на 0,5 или 1 л – 1 шт.;
денсиметр с делениями 1,080-1,160; испытуемый
формалин (должен иметь температуру
18-20С).

Ход
определения.
Формалин наливают в стеклянный цилиндр
до 2/3 его высоты. Денсиметром определяют
удельный вес формалина. Процент
формальдегида рассчитывают по формуле:

Х
= (а – 1)1000

2,5,

Где
а – удельный вес формалина; 1 – удельный
вес воды; 1000 – множитель для дробных
чисел в целые; 2,5 – константа.